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哪些因素会影响紫外分光光度计的光度重复性?
紫外分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
一、紫外分光光度计的光度重复性
紫外可见分光光度计国家计量检定规程规定, 光度重复性要测试3 次, 取3 次中的较大较小之差作为光度重复性。光度重复性的测试方法是选定一个标准样品, 由同一个操作者,进行3~5 次测试, 再计算光度重复性。具体操作方法为: 仪器冷态开机, 预热0. 5h 后, 对标准样品或使用者自选的样品进行光谱扫描, 而后在谱图上选择几个特征吸收峰, 检查在选定的测量次数内, 各个峰值的之差即为光度重复性。人们经常将光度准确度和光度重复性在一次操作中完成。
仪器稳定可靠, 其中很重要的一点就是光度重复性好。可以设想: 一台紫外可见分光光度计, 它的功能很强大、自动化程度很高、外形美观、价格合理, 但它测出的数据不能重复, 那肯定不是好仪器。
二、影响光度重复性的主要因素
影响紫外可见分光光度计光度重复性的主要因素有以下几种。
1.光源系统
光源系统即指灯泡和电源。如果氘灯或钨灯灯泡本身的质量不好, 即使电源很好, 氘灯或钨灯发出的光通量肯定不稳。这样, 紫外可见分光光度计就不可能得到好的、稳定的测试结果。如果氘灯或钨灯的灯泡很好, 但其电源不稳, 那么光源系统(灯泡) 发出的光通量也不可能稳, 也不可能得到好的光度重复性。
2.光电转换器系统
光电转换器系统包括光电转换元件及其供电电源; 光电转换元件是将光信号转换成电信号的关键元件。不管紫外可见分光光度计的其他元部件 多好, 如果光电转换元件不好, 就不可能得到好的光度重复性。
3.如果光电转换元件很好, 其供电电源不好, 电源一直在波动或漂移, 也不可能得到好的光度重复性。因此, 紫外可见分光光度计的制造者和使用者一定要高度重视光电转换器系统对光度重复性的影响。
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