荧光分光光度计操作规程

1. 开机

a. 确认所测试样液体或固体，选择相应的附件。

b. 先开启仪器主机电源，预热半小时后启动电脑程序RF-530XPC，仪器自检通过后，即可正常使用。

2. 测样

(1) spectrum模式

a. 在“Acquire Mode”中选择“Spectrum”模式。

· 对于做荧光光谱的样品，“Configure”中“Parameters”的参数设置如下：

“Spectrum Type”中选择Emission;给定EX波长;给定EM的扫描范围(zui大范围220nm—900nm);设定扫描速度;扫描间隔;狭缝宽度，点击“OK”完成参数的设定。

· 对于做激发光谱的样品，“Configure”中“Parameters”的参数设置如下：

“Spectrum Type”中选择Excitation;给定EM波长;给定EX的扫描范围(zui大范围220nm—900nm);设定扫描速度;扫描间隔;狭缝宽度，点击“OK”，完成参数的设定。

b. 在样品池中放入待测的溶液，点击“Start”，即可开始扫描。

c. 扫描结束后，系统提示保存文件。可在“Presentation”中选择“Graf” “Radar” “Both Axes Ctrl+R”来调整显示结果范围;在“Manipulate” 中选择“Peak Pick”来标出峰位，zui后在“Channel”中进行通道设定。

d. 述操作步骤对固体样品同样适用。

(2) Quantitative模式

a. 在“Acquire Mode”中选择“Quantitative”模式。

b. “Configure”中“Parameters”的参数设置如下：

Method 选择“Multi Point Working Curve” ;“Order of Curve” 中选择 “1st和“No” ;给定EX、EM波长;设定狭缝宽度，点击“OK”，完成参数的设定。

c. 在样品池中放入装有空白溶液的比色皿后执行“Auto Zero” 命令校零点。

d. 点击“Standard”模式，制作工作曲线。

e. 将样品池中的空白溶液换成一系列的已知浓度的样品标准溶液进行测量，执行“Read”命令，得到相应的荧光强度，系统根据测量值自动生成一条“荧光强度-浓度”曲线。

f. 在“Presentation” 中选择“Display Equation”，得到标准方程。将此工作曲线 “Save”为扩展名为“.std”的文件。

g. 工作曲线制备完毕，即可进入未知样的测量，选择进入“Unknown”模式，将样品池中的已知浓度标准溶液换成待测样品溶液，执行“Read”命令，即可得到相应的荧光强度和相应的浓度。将此 “Save”为扩展名为“.qnt”的文件。

(3) Time Course模式

a. 在“Acquire Mode”中选择“Time Course”模式。

b. “Configure”中“Parameters”的参数设置如下：

给定EX、EM波长;设定狭缝宽度;设定反应时间;读取速度;读取点数;

点击“OK”，完成参数的设定。

c. 在样品池中放入装有空白溶液的比色皿后执行“Auto Zero” 命令校零点。

d. 将样品池中的空白溶液换成待测溶液，点击“Start”，即可开始扫描。扫描结束后，即可得到荧光强度对时间的工作曲线。

e. 将此工作曲线“Save”为扩展名为“.TMC”的文件。

3. 关机

退出软件后关毕主机。