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分光光度计的杂散光如何检测?
杂散光是分光光度计的一项重要指标,它是指与测试波长不同的其他波长的光。杂散光的存在对测量结果的影响很大,分析计算表明:由于杂散光的存在而引起的透射比测量误差近似等于杂散光本身,由此可见杂散光是分光光度计的重要误差来源之一。
分光光度计产生杂散光的因很多,其较主要的原因大致有以下9个方面:
1、灰尘沾污光学元件,如光栅、棱镜、透镜、反射镜、滤光片等;
2、光学元件被损伤,或光学元件产生的其他缺陷,如光栅、透镜和反射镜、棱镜材料中的气泡等;
3、准直系约部或有关隔板边缘的反射;
4、光学系统或检测器没有作适当的屏蔽;
5、热辐射或荧光引起的二次电子发射;
6、狭缝的缺陷;
7、光束孔径不匹配;
8、光学系统的像差;
9、单色器内壁黑化处理不当。
分光光度计只测试220nm处的杂散光,
不测试340nm处的杂散光,
这样是不正确的,
需测试220nm处杂散光是因为:
①据仪器学理论中的电光源理论,氘灯在220nm处能量很小,即信号很小,容易显现杂散光;
②根根据量子光学理论,波长是能量的倒数,波长短能量大,容易产生杂散光,而220nm处属于短波部分;
③根据仪器学理论中的光电发射理论,光电倍增管在220nm处的光谱响应(灵敏度)低,容易显现杂散光。而测试340nm处杂散光的原因是不同的,因为340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方,此时容易产生杂散光。所以,对于分光光度计来讲,应该测试220nm和340nm两处的杂散光。
杂散光的测试方法:
1、首先将参比液注入配对石英石吸收池,分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。
2、将减光片插入试样光路的滤光片槽内,其读数即为减光片的衰减值K,然后将减光片插入参比光路的滤光片座内,
3、将石英吸收池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液,插入试样试样池座中,在相应的波段内扫描、打印;在记录纸的作标上量取测定波长处的透光度,乘以衰减值K,即得各测定波长处的杂散光值。
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